服務(wù)熱線
021-60873559
病毒大規(guī)模培養(yǎng)神器
微載體 Cytodex
入門篇
近期疫情逐漸穩(wěn)定,希望新的一年大家心寬體「胖」。 因?yàn)槲⑤d體的貼壁培養(yǎng)工藝廣泛應(yīng)用在疫苗的大規(guī)模生產(chǎn)中,接下來,咱們就聊聊病毒大規(guī)模培養(yǎng)的神器-微載體。那么什么是微載體?不同類型微載體的特點(diǎn)?微載體如何操作?以及有哪些成功的應(yīng)用案例呢?
圖 1 Cytodex 微載體上的 Vero 細(xì)胞(染色)
01
什么是 Cytodex 微載體?
Cytodex 微載體是專門為培養(yǎng)各種動(dòng)物細(xì)胞的高產(chǎn)量而開發(fā)的,針對(duì)不同類型動(dòng)物細(xì)胞,有 Cytodex 和 Cytopore 兩個(gè)系列(見圖 1),在這里詳細(xì)地給大家介紹下 Cytodex。
Cytodex 微載體(Cytodex 1&3)是基質(zhì)為葡聚糖的微球,細(xì)胞可貼附微球 2D 表面生長(zhǎng),1 g 的 Cytodex1 微載體提供 4400 cm 2 的表面積給細(xì)胞貼附。 Cytodex 1幾乎適合所有貼壁細(xì)胞。 Cytodex 3表面包被膠原,適合無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)。除標(biāo)準(zhǔn)的 Cytodex 產(chǎn)品外, Cytodex 還有經(jīng)過 Gamma 射線滅菌的產(chǎn)品,無需繁瑣的水化滅菌,可以直接使用。
Cytodex 微載體的特點(diǎn)
①表面特征經(jīng)過優(yōu)化,適于細(xì)胞高效粘附和伸展;
②大小和密度經(jīng)過優(yōu)化,有利于均勻懸浮,適于寬范圍的細(xì)胞優(yōu)良生長(zhǎng)和高產(chǎn);
③基質(zhì)是生物惰性的,為攪拌培養(yǎng)提供了一個(gè)堅(jiān)硬但是非剛性的底物;
④透明,貼附的細(xì)胞用簡(jiǎn)單的顯微鏡就能觀察到。
⑤可放大性好。動(dòng)物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)已經(jīng)達(dá)到 15,000 L 規(guī)模,貼壁依賴型細(xì)胞的微載體培養(yǎng)已經(jīng)達(dá)到 6,000 L 規(guī)模。
表 1 微載體的詳細(xì)參數(shù)
02
微載體有哪些應(yīng)用?
微載體的應(yīng)用領(lǐng)域非常廣泛,疫苗、單克隆抗體、天然和重組蛋白,還有前景廣闊的免疫細(xì)胞治療領(lǐng)域。
歐洲和世界范圍內(nèi)的許多國(guó)家的絕大多數(shù)減毒或滅活疫苗類型的人用和獸用疫苗都在使用微載體進(jìn)行生產(chǎn)(見表 2)。基于微載體生產(chǎn)的疫苗包括脊髓灰質(zhì)炎、風(fēng)疹、狂犬病、流感、日本腦炎(乙型腦炎)、呼吸道合胞病毒(RSV)和口蹄疫(FMD)疫苗等。與其他細(xì)胞培養(yǎng)工藝相比,微載體培養(yǎng)工藝可以提高產(chǎn)量,降低成本,并減少污染。Sinskey 等人觀察,使用微載體培養(yǎng)工藝,新德畢斯病毒(Sindbis virus)的單位體積產(chǎn)量可以達(dá)到滾瓶培養(yǎng)的 50 多倍。
表 2 微載體在疫苗工業(yè)中的應(yīng)用狀況
03
Cytodex 微載體
可以培養(yǎng)哪些細(xì)胞?
實(shí)際上,所有培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞類別都可培養(yǎng)。Cytodex1 微載體是一般應(yīng)用的細(xì)胞培養(yǎng)表面,凡是能在體外貼壁的細(xì)胞將都能夠粘附到 Cytodex1 微載體上。Cytodex3 也為許多在玻璃或者塑料表面粘附或者功能較弱的細(xì)胞 類型提供了一個(gè)改良的培養(yǎng)表面。
上下滑動(dòng)查看完整列表
表 3 按組織分類的在 Cytodex 微載體上培養(yǎng)的細(xì)胞類型列表
哺乳動(dòng)物、禽類、魚和昆蟲細(xì)胞已經(jīng)在 Cytodex 微載體上培養(yǎng), 它們具有廣泛的組織來源,包括 原代細(xì)胞, 二倍體細(xì)胞株和 傳代/轉(zhuǎn)化的細(xì)胞系。雜交細(xì)胞系和腫瘤來源的細(xì)胞系也可以,根據(jù)相關(guān)統(tǒng)計(jì)大約有 150 多種細(xì)胞可以在 Cytodex 微載體上培養(yǎng)。
快看看你的細(xì)胞
可以在微載體上培養(yǎng)嗎?